科研-人多配體蛋白聚糖1（Syndecan-1）定量檢測試劑盒

產(chǎn)品品牌：睿信生物 商品貨號：JRX129506

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  • 產(chǎn)品售價： 3000 2000
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反應(yīng)種屬 人
檢測范圍 12.5ng/ml-200ng/ml
物理性能 液體組分應(yīng)澄清，無沉淀或絮狀物；所有組分應(yīng)無包裝破損。
用途 定量檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、組織中人多配體蛋白聚糖1（Syndecan-1）的含量。
實驗原理 試劑盒采用酶聯(lián)免疫分析方法。采用生物素標(biāo)記多配體蛋白聚糖1（Syndecan-1），純化的抗多配體蛋白聚糖1（Syndecan-1）抗體包被微孔板，在競爭抑制反應(yīng)中，一定量的固相抗體與生物素標(biāo)記多配體蛋白聚糖1（Syndecan-1）及非標(biāo)記抗原（校準(zhǔn)品或標(biāo)本）進行抑制競爭反應(yīng)，抗體與生物素標(biāo)記的多配體蛋白聚糖1（Syndecan-1）結(jié)合量受非標(biāo)記抗原量所抑制，非標(biāo)記抗原量多,抗體與生物素標(biāo)記的多配體蛋白聚糖1（Syndecan-1）結(jié)合就少，反之結(jié)合就多；反應(yīng)平衡后，形成固相抗體-生物素化Syndecan-4，再加入酶標(biāo)記的親和素，形成固相抗體-生物素化多配體蛋白聚糖1（Syndecan-1）-酶標(biāo)-親合素復(fù)合物。經(jīng)加底物顯色后，用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）。隨著多配體蛋白聚糖1（Syndecan-1）濃度的升高，OD值逐漸下降呈良好的線性關(guān)系。本試劑盒具有靈敏度高、特異性強、重復(fù)性好、操作簡單、快速等特點，對血清中多配體蛋白聚糖1（Syndecan-1）的減少或升高有可靠的檢出性能。
特異性 本試劑盒識別天然和重組人多配體蛋白聚糖1（Syndecan-1），與結(jié)構(gòu)類似物無交叉。
重復(fù)性 批內(nèi)變異系數(shù) CV%小于 15%，批間變異系數(shù) CV%小于 15%。
回收率 回收率在 85%-115%之間
試驗所需自備試驗器材 1、酶標(biāo)儀（450nm）
2、精密移液器及一次性吸頭
3、蒸餾水
4、洗瓶或者自動洗板機
5、37℃水浴鍋或恒溫箱
6、500ml 量筒
操作程序 1. 將各種試劑移至室溫平衡兩小時，取濃縮洗滌液，根據(jù)當(dāng)批檢測數(shù)量，用蒸餾水 1：20 稀釋，混勻后備用。
2. 將預(yù)包被板從密封袋中取出，設(shè)一個空白對照孔，不加任何液體；每個校準(zhǔn)品設(shè) 2 孔，每孔加入對應(yīng)校準(zhǔn)品 50μl；其余每個檢測孔直接加待測血清或質(zhì)控品 50μl。
3. 除空白孔外所有孔加入生物素化抗原 50μl，混勻，貼上封板膜，置 37℃溫育 60 分鐘。
4. 手工洗板：棄去孔內(nèi)液體，洗滌液注滿各孔，靜置 10 秒甩干，重復(fù) 3 次后拍干。洗板機洗板：選擇洗滌 3 次程序洗板后拍干。
5. 每孔加入酶標(biāo)親合素 50μl（空白對照孔除外），混勻，貼上封板膜，置 37℃溫育 30 分鐘。
6. 手工洗板：棄去孔內(nèi)液體，洗滌液注滿各孔，靜置 10 秒甩干，重復(fù) 3 次后拍干。洗板機洗板：選擇洗滌 3 次程序洗板后拍干。
7. 每孔加顯色劑 A 50μl，顯色劑 B 50μl，振蕩混勻后，置 37℃避光顯色 15 分鐘，每孔加終止液 50μl。
用酶標(biāo)儀讀數(shù)，取波長450nm，先用空白對照孔調(diào)零點，然后測定各孔光密度值（OD值）。
注意事項 1：如果試劑盒的組份需要再次使用，請確保上一次使用之后沒有被污染。
2：酶標(biāo)板單次未使用完，要謹(jǐn)記密封放到 2-8℃保存。
問題分析 ①問題描述：標(biāo)準(zhǔn)曲線差
可能原因及相應(yīng)對策：
1.試劑盒平衡時間不夠——不低于 2 個小時的室溫平衡
2.吸取及洗滌不充分——充分的吸取及洗滌
3.移液不精確——檢查和校正移液器
②問題描述：精密度低
可能原因及相應(yīng)對策：
1.洗滌不充分——按說明書要求充分洗滌和浸泡
2.混勻不充分和吸取試劑不足——充分混勻和吸取試劑
3.重復(fù)利用吸頭、容器和覆膜——使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的封板模
4.加樣不精確——檢查和校正移液器
③問題描述：O.D值低
可能原因及相應(yīng)對策：
1.每孔加的試劑量不精確——校正移液器，精確加入試劑
2.溫育時間不正確——保證充足的溫育時間
3.溫育溫度不正確——試劑要平衡至室溫并保證準(zhǔn)確的溫育溫度
4.酶標(biāo)記物或底物失效——通過混合酶標(biāo)記物和底物，顏色迅速顯現(xiàn)來檢查
5.沒有加入終止液——按照說明書實驗操作步驟加入終止液
6.超出讀數(shù)時間讀數(shù)——在說明書推薦的讀數(shù)時間內(nèi)讀數(shù)
④問題描述：樣本值
可能原因及相應(yīng)對策：
1.不正確的樣本儲存方式——正確儲存樣本，使用新鮮樣本進行實驗
2.不正確的樣本收集和處理方法——采取正確的樣本收集和處理方法
3.待測物質(zhì)在樣本中含量低——使用新鮮樣本，重復(fù)實驗
聲明 該試劑盒僅供研究使用，如將其用于臨床診斷或任何其他用途，我公司將不對因此產(chǎn)生的問題負責(zé)，亦不承擔(dān)任何法律責(zé)任。

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